Битва при Павії стала останньою битвою Середньовіччя; бойове хрещення прийняв мушкет, який потім надовго став основним видом вогнепальної зброї для всіх європейських армій. Іспанці втратили 500 солдатів загиблими і пораненими, французи - 12 тисяч. Франциск I потрапив у полон і був змушений поступитися Карлу V Бургундію і Мілан. Правда, світ виявився крихким; як тільки Франциска відпустили, він визнав договір недійсним.
Після смерті короля Неаполя Фердинанда I 1494 року почався династичний конфлікт, який швидко переріс у загальноєвропейський. У 1519-му році в кровопролитних війнах почався новий етап. Імператором Священної Римської імперії став король Іспанії Карл V. Він об'єднав під своєю короною великі території: Німеччину, Іспанію, Нідерланди, Неаполь і Сицилію. Через два роки після сходження на престол Карла V відновилися військові дії в Італії. У 1524-му французькі війська перейшли через Альпи з метою повернути Парижу Ломбардію. На чолі загонів стояв сам Франциск I; за спогадами сучасників, французький король відрізнявся хоробрістю, часом нерозважливою. У його війську перебували близько 26 тисячі осіб. Вони підійшли до Павії - міста на річці Тічино за декілька десятків кілометрів від Мілана.
Місто охороняли близько 7 тисяч ландскнехтів і 700 іспанських воїнів. Франко-швейцарська армія осадила Павію і кілька разів атакувала фортецю, але безуспішно. Облога тривала чотири місяці. Місто захищали переважно наймані працівники, і невиплата платні могла вплинути на їх лояльність. Стан справ змінився, коли до Павії підійшла імперська армія чисельністю близько 25 тисяч осіб. Спочатку в похід виступили 40 тисяч бійців, але на шляху до Павії частина солдатів дезертирувала. Бій почався рано вранці 1525 року. На озброєнні у іспанців були фітильні мушкети, вага яких становила близько 9 кг. За допомогою цієї зброї можна було пробити найтовстіший обладунок на великій дистанції. Стріляти без додаткової допомоги було неможливо; опорою для рушниці служила спеціальна сошка. Саме мушкети забезпечили іспанцям перемогу.
Бойові дії ускладнювалися погодними умовами; стояв густий туман. Сили французів були ізольовані один від одного. Загін швейцарців розташовувався біля східної стіни, лицарська кінниця на чолі з Франциском I - на північному заході. Французьку кавалерію обстріляли з аркебуз. Ландскнехти, які спробували прорватися на допомогу Франциску, були розгромлені (німці билися з обох сторін). Про битву при Павії розповідають 7 гобеленів авторства Бернарда ван Орлея. Зараз вони зберігаються в Національному музеї Каподімонте в Італії.
Жертвами битви при Павії став колір французької аристократії. Франциск I потрапив у полон, його перевезли до Іспанії. Він писав матері: «Втрачено все, крім честі і життя». 1526 року був підписаний Мадридський договір; Франція позбавлялася Бургундії, а також відмовлялася від претензій на Фландрію та Італію. Крім того, французький монарх зобов'язався одружитися з сестрою Карла Елеоноре. У березні він був звільнений і проголосив себе вільним від умов договору. Заручившись підтримкою Папи Римського Климента VII, Франциск відновив бойові дії.